通道蛋白改变吸收杀虫剂

此篇农资内容会给网友们阐述一下“通道蛋白改变吸收杀虫剂”的内容进行细致讲解，希望对农资人们有些许帮助，还不赶紧收藏吗！

1、茚虫威喷后菜蝶还来吗？

一般不会来。

茚虫威是一种新型噁二嗪类杀虫剂，钠通道阻断型杀虫剂，能杀幼虫，对各龄幼虫均有效，杀虫速度较快，作用方式是胃毒和触杀作用。几乎对所有鳞翅目害虫有杀虫活性，如稻纵卷叶螟、棉铃虫、菜青虫、斜纹夜蛾、甜菜夜蛾、小菜蛾、烟青虫、李小食心虫等，也可用于防治外来生物红火蚁，作为卫生杀虫剂还登记用于防治蜚蠊（即蟑螂）。

2、杜邦康宽使用说明？

康宽：由美国杜邦公司研制的新一代杀虫剂。它的作用：高效激活昆虫细胞内的鱼尼丁受体，与之结合，导致该受体通道非正常长时间开放，从而过度释放细胞内的钙离子，导致昆虫肌肉麻痹，最后瘫痪死亡。

它的主要作用途径是胃毒和触杀，在接触到药物后几分钟内害虫即停止取食，在3天内死亡。

该农药属微毒级，对施药的人员非常安全，持效期可以达到15天，对农产品无残留影响。在蔬菜上使用时，安全间隔期为一天（施药24小时后即可食用）。

3、最近几年在我们四川有种虫叫电杆虫，夏季到处爬，冬季在泥巴里卷成一团。看到很肉麻，请问要怎么根除？

用杀虫水悬剂灭掉爬到屋里的虫，堵住进屋的通道，用环卫乐杀虫剂处理后房前屋后的植被、物品防止生虫

4、康宽杀虫剂有效期多少天？

有效期：2年。

康宽：由美国杜邦公司研制的新一代杀虫剂。它的作用：高效激活昆虫细胞内的鱼尼丁受体，与之结合，导致该受体通道非正常长时间开放，从而过度释放细胞内的钙离子，导致昆虫肌肉麻痹，最后瘫痪死亡。它的主要作用途径是胃毒和触杀，在接触到药物后几分钟内害虫即停止取食，在3天内死亡。该农药属微毒级，对施药的人员非常安全，持效期可以达到15天，对农产品无残留影响。在蔬菜上使用时，安全间隔期为一天（施药24小时后即可食用）。

5、氟虫双酰胺的作用？
几乎所有的鳞翅目类害虫均具有很好的活性，不仅对成虫和幼虫都有优良的活性，而且作用速度快、持效期长。

对水稻二化螟和卷叶螟效果绝对是一流的。　　对蜜蜂毒性很低，对鲤鱼（水生生物的代表）毒性也很低。在一般用量下对有益虫没有活性（几乎无毒）。　　属新型邻苯二甲酰胺类杀虫剂，激活兰尼碱受体细胞内钙释放通道，导致贮存钙离子的失控性释放。是目前为数不多的作用于昆虫细胞兰尼碱(Ryanodine)受体的化合物。对鳞翅目害虫有光谱防效，与现有杀虫剂无交互抗性产生，非常适宜于现有杀虫剂产生抗性的害虫的防治。对幼虫有非常突出的防效，对成虫防效有限，没有杀卵作用。渗透植株体内后通过木质部略有传导。耐雨水冲刷。

拓展好文：吸收转运新**类杀虫剂的质膜内在水通道蛋白及其编码基因与应用的制作方法

　　本发明属于生物技术领域，特别是一种来源于小白菜的质膜内在水通道蛋白及其在提高农作物新**类杀虫剂传输利用效率中的应用。

　　技术背景

　　新**类杀虫剂（如噻虫嗪、吡虫啉、啶虫脒、烯啶虫胺和呋虫胺等）是与天然杀虫剂尼古丁结构相似的合成化合物，其靶向作用于昆虫中枢神经系统的**型乙酰胆碱受体(nachrs)，因此具有较高的选择性，与传统杀虫剂相比对非靶标生物毒性较低，新**类杀虫剂极性强，溶解性高，内吸作用强，用于茎叶喷雾、土壤灌根、种子处理，施药后叶片或根系通过内吸迅速传输到植株各部位，可有效防治蚜虫、潜叶蛾等害虫，现已在世界范围内广泛使用，占据了杀虫剂市场的24%及种衣剂市场的80%。。

　　水通道蛋白主要促使水分的双向跨膜运动,它所介导的自由水快速被动地跨生物膜转运,是水进出细胞的主要途径。一般而言，植物水通道蛋白都是mip超家族的成员，不同植物的水通道蛋白分子结构同源性很高，序列非常保守。在分子结构方面，都有典型的6个跨膜结构域和5个环，并且被分别命名为a、b、c、d和ｅ环，所有的成员在ｂ环和ｅ环都含有一个保守性非常高的npa结构（asn-pro-ala，npa）。johanson等（johansonu.thecompletesetofgenesencodingmajorintrinsicproteinsinarabidopsisprovidesaframeworkforanewnomenclatureformajorintrinsicproteinsinplants.plantphysiology,2026,126(4):1358-69.）根据氨基酸序列同源性和亚细胞定位将水通道蛋白划分为5个家族：质膜内在蛋白(pips)，液泡膜内在蛋白(tips)，类no**n26膜内在蛋白(nips)，小的碱性膜内在蛋白(sips)和类glpf膜内在蛋白(gips)。球蒴**中除了有上述5类水通道蛋白以外，还具有xips和hips等2个新类别(bienertgp,biener**,jahntp,etal.solanaceaexipsarepla**amembraneaquaporinsthatfacilitatethetransportofmanyuncharg**substrates.plantjournal,2026,66(2):306-317.)。

　　除了转运水分子以外，研究发现水通道蛋白还能运输一些小分子物质如甘油、硅酸、铵、**素、硼酸、co2、亚砷酸盐、h2o2和氨等。一些茄科xips还能够促进一些中性小分子如甘油、**素的运输。拟南芥中，atnip6;1和atnip7;1参与硼的转运，能调节硼在地上部与花粉中的营养分配比例lit,choiwg,wallaceis,etal.arabidopsisthaliananip7;1:ananther-specificboricacidtransporteroftheaquaporinsupe**milyregulat**byanunusualtyrosineinhelix2ofthetransportpore.biochemistry,2026,50(31):6633-6641.)。terashima等（terashimai,onok.effectsofhgcl2onco2dependenceofleafphotosynthesis:evidenceindicatinginvolvementofaquaporinsinco2diffusionacrossthepla**amembrane.plantcellphysiology,2026,43(1):70-78.）使用hgcl2抑制剂证明水通道蛋白能够促进co2在质膜上的转运，增强植物的光合作用。酵母细胞及爪蟾卵母细胞的功能表达实验表明zmpip1;5，zmpip1;6能够增强拟南芥保卫细胞中co2的运输(heinenrb,bienertgp,cohend,etal.expressionandcharacterizationofpla**amembraneaquaporinsinstomatalcomplexesofzeamays.plantmolecularbiology,2026,86(3):335-350.)。水稻osnip2;1，osnip1;1，osnip3;3参与了水稻对亚砷酸盐的吸收，osnip3;2参与了水稻对三价砷的吸收（cheny,sunsk,tangz,etal.theno**n26-likeintrinsicmembraneproteinosnip3;2isinvolv**inarseniteuptakebylateralrootsinrice.journalofexperimentalbotany,2026,68(11):3007-3016.;sunsk,cheny,chej,etal.decreasingarsenicaccumulationinricebyoverexpressingosnip1;1and,osnip3;1throughdisruptingarseniteradialtransportinroots.newphytologist,2026.）。moller等（mollerim.plantmitochondriaandoxidativestress:electrontransport,nadphturnover,andmetaboli**ofreactiveoxygenspecies.annualreviewofplantbiology,2026,52(4):561-591.）研究表明aqp8能促进h2o2从线粒体基质中的释放。

　　然而现有水通道蛋白相关报道涉及多个结构差异较大的小分子物质，但较大的分子（如新**类杀虫剂）尚未见相关促进转运功能的报道。

　　技术实现要素：

　　针对上述问题，本发明目的在于提供一个新的负责新**类杀虫剂跨膜转运的质膜内在水通道蛋白及其编码基因，该基因是从小白菜中分离的一个dna分子，申请人将其命名为brapip2;1；本发明同时还提供了质膜内在水通道蛋白在提高植物新**类杀虫剂噻虫嗪转运效率中的应用。

　　具体而言，上述发明是通过如下技术方案实现的：

　　 本申请提供了一种质膜内在水通道蛋白，该蛋白氨基酸序列如seqidno.2所示。该质膜内在水通道蛋白来源于小白菜，定位于质膜上。通过分子对接技术发现，新**类杀虫剂分子能穿过该蛋白的空洞；相对于无添加新**类杀虫剂（噻虫嗪等）而言，该质膜内在水通道蛋白在添加噻虫嗪的环境中表达丰度显著增强，具有强大地介导噻虫嗪跨膜传输的特征，且加入水通道蛋白抑制剂后，可以抑制小白菜对不同新**类杀虫剂的吸收。

　　 本发明还提供了上述氨基酸序列如seqidno.2所示质膜内在水通道蛋白的编码基因brapip2;1，其核苷酸编码序列如seqidno.1所示。该基因的克隆方法如下：采用rna**totalrnakit试剂盒(tiangenbiotech,beijing,china)提取小白菜根的总rna，根据primescript1ststrandcdnasynthesiskit(invirtrogen)试剂盒步骤，以2g总rna为模板，以oligo(dt)18作为锚定引物合成第一链cdna，根据本研究室小白菜转录组分析结果中pip1;1的氨基酸序列信息，设计保守区的简并引物，以上述合成的第一链cdna为模板，通过简并全长引物扩增orf序列，扩增pcr产物送测序，申请人将其自命名为brapip2;1。

　　第三，本发明的一个实施例提供了一种含有上述编码基因brapip2;1的重组表达载体，进一步，该重组表达载体为酿酒酵母表达载体，该酿酒酵母表达载体包括但不限于载体pyes2。

　　第四，本发明的一个实施例提供了一种含有上述编码基因brapip2;1的双元超表达载体，该双元超表达载体包括但不限于载体pcambia2301。

　　第五，本发明的一个实施例提供了氨基酸序列如seqidno.2所示的质膜内在水通道蛋白在提高植物对新**类杀虫剂的吸收转运效率中的应用，所述植物包括拟南芥、蔬菜（小白菜等）、水稻，玉米，小麦，油菜，中的至少一种；所述新**类杀虫剂包括噻虫嗪、吡虫啉、啶虫脒、烯啶虫胺、呋虫胺中的一种或多种。

　　第六，本发明的一个实施例公开了一种促进植物对新**类杀虫剂吸收转运方法：将含有如seqidno.1所示核苷酸序列的双元超表达载体导入植物体内表达，以促进植物对新**类杀虫剂吸收转运；该双元超表达载体包括但不限于载体pcambia2301；所述植物优选蔬菜、水稻、玉米、小麦、油菜、拟南芥中的至少一种；所述新**类杀虫剂优选噻虫嗪、吡虫啉、啶虫脒、烯啶虫胺、呋虫胺中的至少一种。

　　本发明首次发现水通道蛋白参与了新**类杀虫剂的跨膜转运，并首次发现质膜内在水通道蛋白中的brapip2;1基因资源并对其进行功能鉴定，本发明提供的小白菜质膜内在水通道蛋白主要定位于质膜，可介导新**分子的转运，具有灵敏地响应外界环境中噻虫嗪的特征，同时具有快速地介导噻虫嗪从细胞膜外到细胞膜内的功能，促进噻虫嗪在植株体内的积累，在农药开发方面具有重要的应用价值。

　　附图说明

　　图1为brapip2;1蛋白的亚细胞定位示意图；

　　共聚焦显微镜观察的瞬时转化48小时的烟草叶片细胞。比例尺=40μm。

　　图2为水通道抑制剂对小青菜吸收不同新**类杀虫剂及**的影响（a:噻虫嗪；b：吡虫啉；c:啶虫脒；d:烯啶虫胺；e:呋虫胺；f:**）。

　　图3为brapip2;1与不同新**类杀虫剂及**分子对接分析。

　　图4为brapip2;1的表达特征及对的响应特征示意图；

　　其中，a为根组织brapip2;1对外界噻虫嗪的响应特征；b为地上组织brapip2;1对外界噻虫嗪的响应特征。

　　图5为brapip2;1重组酵母菌株在噻虫嗪胁迫下的生长情况和噻虫嗪含量示意图；

　　其中，图a为重组酵母在不同浓度噻虫嗪胁迫下的生长；b为重组酵母菌株的噻虫嗪含量示意图。

　　图6为brapip2;1转基因拟南芥植株在噻虫嗪胁迫下的生长情况和噻虫嗪含量示意图；

　　其中，a为转基因拟南芥植株在不同浓度噻虫嗪胁迫下的生长情况；b为转基因拟南芥植株在不同浓度噻虫嗪胁迫下的主根长度示意图；c为转基因拟南芥植株的噻虫嗪含量示意图；brapip2;1#3和brapip2;1#5为超表达拟南芥株系。

　　具体实施方式

　　以下结合实例进一步说明本申请的的技术方案。

　　实施例1brapip2;1基因全长编码区的克隆及分析

　　1.brapip2;1的orf扩增

　　根据用rna**totalrnakit试剂盒(tiangenbiotech,beijing,china)操作步骤，提取小白菜根部位样品的总rna以2g总rna为模板，以oligo(dt)18作为锚定引物，参照primescript1ststrandcdnasynthesiskit(invirtrogen)试剂盒说明书合成第一链cdna，设引物进行pcr扩增获得单一的cdn**段，引物序列如下：上游引物序列（seqidno.3）atggcgaaggacgtggaagc;下游引物序列（seqidno.4）：ttaaacgttggcagcacttctg。

　　扩增体系总体积50.0ul，包括cdna20ng、5×primestarbuffer10.0ul、2.5mmol·l-1dntps4.0ul、10mmol·l-1正向引物和反向引物各2.0ul、primestarhsdnapolymerase1.25u，用重蒸水补足至50.0ul。

　　扩增程序为:95℃预变性5min，98℃变性10s、55℃复性15s、72℃延伸60s，共35个循环。

　　pcr产物送擎科生物公司进行测序，测序结果表明，brapip2;1的cdna全长序列为2550bp，brapip2;1的cdna及其编码的蛋白质氨基酸序列分别如seqidno.1及seqidno.2所示。

　　实施例2.brapip2;1的亚细胞定位

　　参照文献liuetal.（liut,etal.unconventionallysecret**effectorsoftwofilamentouspathogenstargetplantsalicylatebiosynthesis.natcommun5,4686.2026）将brapip2;1构建到亚细胞定位载体pbingfp4上，通过冻融法转化到农杆菌菌株gv3101(江苏省农业科学院实验室保存)中。瞬时转化烟草，48h-60h后在荧光显微镜下观察荧光。发现，绿色荧光信号主要分于细胞膜或核膜上(见图1)，说明brapip2;1主要定位于与跨膜运输有关在细胞膜和核膜上。

　　实施例3抑制水通道蛋白活性可降低蔬菜对新**类农药的吸收累积量。

　　参照论文（wenfengw,wanq,liy,etal.uptake,translocationandsubcellulardistributionofpesticidesinchinesecabbage(brassicarapavar.chinensis)[j].ecotoxicologyandenvironmentalsafety,2026.）在已添加2mg/l**类化合物（噻虫嗪、吡虫啉、啶虫脒、烯啶虫胺和呋虫胺、**）的等体积霍格兰德营养液中添加不同浓度的水通道抑制剂氯化汞和甘油，48h后分别测定小白菜植株（三叶一心）中的**类化合物的浓度。每个处理五个重复。

　　为确定水通道蛋白是否能转运新**类杀虫剂分子及**，在已添加2mg/l不同新**类杀虫剂（噻虫嗪、吡虫啉、啶虫脒、烯啶虫胺和呋虫胺）及**的等体积营养液中添加不同浓度的水通道抑制剂氯化汞（hgcl2）和甘油（glycerol），分别测定植株中的**化合物浓度。

　　检测结果如图2所示，添加水通道抑制剂后，新**在植株里的含量都极显著地降低，而**在植株中的含量没有发生显著性变化。由此可知水通道抑制剂能显著抑制上海青对新**类杀虫剂的吸收，而不能抑制**的吸收。说明水通道蛋白参与了新**类杀虫剂的跨膜转运。

　　实施例4brapip2;1蛋白与不同新**及**的分子对接分析

　　将brapip2;1氨基酸序列通过同源建模的方法获得brapip2;1的3d结构，通过分子对接技术，以验证新**类杀虫剂分子（噻虫嗪、吡虫啉、啶虫脒、烯啶虫胺和呋虫胺）和**分子能否穿过bapip2;1晶体结构中间的孔道，对接范围包括整个蛋白构象，因此可以通过生成的众多构象中筛选新**类杀虫剂分子和**分子进入蛋白中央孔径内部的对接结果，以此分析类杀虫剂分子能否穿过蛋白孔洞。

　　对接所用软件为autodocktools-1.5.6，设置对接盒子大小为100?*126?*100?,采用半柔性对接，算法采用拉马克遗传算法，对接生成结果200次。对接结果见图3：新**类杀虫剂分子（噻虫嗪、吡虫啉、啶虫脒、烯啶虫胺和呋虫胺）结合在蛋白的通道中央，证明噻虫嗪等新**类杀虫剂分子在进入通道时不会产生空间位阻。而**分子不能结合在蛋白的通道中央，证明**分子在进入通道时会产生空间位阻。

　　以上结果说明brapip2;1蛋白能转运新**类杀虫剂，而不能转运**。

　　实施例5brapip2;1基因对环境噻虫嗪胁迫的响应

　　将生长情况一致的小白菜上海青幼苗置于含有10mg/l噻虫嗪的hoagland's培养液（hoagland's营养液购自北京酷来搏科技有限公司），在hoagland's培养液中处理6和24小时（处理组）。

　　同时不含有噻虫嗪的hoagland's培养液为对照组；

　　分别提取两组处理根和地上组织的rna，反转录获得第一链cdna作为模板，根据brapip2;1的cdna序列设计特异性表达引物，以小青菜tublin为内参，通过定量rt-pcr检测基因转录水平的表达情况。

　　定量pcr引物设计：

　　brapip2;1-f(seqidno.5）:tcactggaactggaatcaaccc；

　　brapip2;1-r(seqidno.6）:cctgaagccctcaaaacgaac；

　　tublin-f(seqidno.7）:actgggtgttttgggttggg；

　　tublin-r(seqidno.8）:tgaaggggattgctctgatgac；

　　定量仪器为7500realtimepcrsystem(appli**biosystem)，参照试剂盒2×tsingkemasterqpcrmix(擎科生物公司)的说明书配置qpcrt体系；pcr程序为：预变性95℃10min；95℃15s，60℃20s，40个循环。

　　qrt-pcr结果表明，brapip2;1在地上和地下的都表达，与对照相比，在添加噻虫嗪的条件下brapip2;1在处理6小时和24小时后，根和地上部位的的表达丰度极显著增强（p<0>

　　实施例6.超表达brapip2;1基因酿酒酵母可提高对噻虫嗪的胁迫耐受。

　　将通过实施例1克隆得到的brapip2;1基因构建到酿酒酵母过表达载体pyes2（购自clotech公司）上参照文献（贺琳，蒋丽丽，王玉成，柽柳硫氧还蛋白过氧化物酶(thprx1)基因转入酵母的抗逆能力分析，东北林业大学学报，2026,第39卷.第4期,101-104），构建的重组质粒命名为pyes2-brapip2;1。将pyes2-brapip2;1及空载体pyes2用乙酸锂沉淀法转化酿酒酵母invsc1(saccharomycescerevisiae)，重组酵母分别命名为invsc1(pyes2-brapip2;1)和invsc1(pyes2)。

　　重组菌株的诱导：挑取对照酵母invscl(pyes2)和重组酵母invscl(pyes2-brapip2;1)单菌落，分别接种于sc-u液体培养基(加入终浓度2%葡萄糖)中，30℃摇床振荡培养24h，测其od600值，计算所需菌液量，使10ml诱导培养基(sc-u+2%半乳糖)中菌体od600为0.4，30℃诱导表达24h;再次测其od600值，计算所需的菌液量。

　　重组菌株的噻虫嗪胁迫生长实验：参照文献“贺琳，蒋丽丽，王玉成，柽柳硫氧还蛋白过氧化物酶(thprx1)基因转入酵母的抗逆能力分析，东北林业大学学报，2026，第39卷.第4期,101-104”中公开的方法，测定诱导后的菌液od600值，计算所需的菌液量，使200μl体积中菌体od600为2，8500r/min，离心1min，弃上清。

　　噻虫嗪胁迫处理:将菌体分别重悬于200μl0,10,100,400,800,1600mg/l的噻虫水嗪溶液中，30℃胁迫72h。将菌液依次稀释10、100、1000、10000、100000倍后取3μl涂在sc-u(加入终浓度为2%的葡萄糖)的固体培养基上;30℃培养48h。结果如图5a所示：转基因菌株（pyes2-brapip2;1）在不添加噻虫嗪情况下，生长与野生菌株（pyes2）一致，添加噻虫嗪的情况下，生长明显弱于野生将菌株。

　　重组菌株的噻虫嗪含量实验：测定诱导后的菌液od600值，计算所需的菌液量，使500ml体积中菌体od600为0.1，8500r/min，离心1min，弃上清。将菌体重悬于500ml分别含10和100mg/l噻虫嗪的sc-u液体培养基(加入终浓度2%葡萄糖)中，30℃胁迫6h，测定od600值。6000rpm，10min离心后，菌体用超纯水洗三次后，菌体用玻璃珠结合超声的方法破壁后提取噻虫嗪测定量。在10mg/l噻虫嗪胁迫下，重组菌株的噻虫嗪含量为0.0071ng/od极显著高于对照菌株（0.0038ng/od）,在100mg/l噻虫嗪胁迫下，重组菌株（pyes2-brapip2;1）的噻虫嗪含量为0.028ng/od极显著高于对照菌株（pyes2，0.011ng/od）（见图5b）。

　　实施例7.brapip2;1基因在拟南芥超表达可提高拟南芥对噻虫嗪的吸收和累积量

　　将通过实施例1克隆得到的brapip2;1基因构建到植物双元超表达载体pcambia2301（购自clotech公司）上，通过根癌农杆菌介导方法（valvekens,d.,vanmontagu,m.,andlijsebettens,m.v.(1988).agrobacteriumtumefaciens-m**iat**transformationofarabidopsisthalianarootexplant**yusingkanamycinselection.proc.natl.acad.sci.usa85,5536-5540.）将构建的超表达载体侵染野生型拟南芥col-0（购自美国atcc）的花絮，通过筛选（在含50μg/ml卡那霉素的1/2ms平板上筛选抗性纯系苗），鉴定获得brapip2;1超表达拟南芥纯系材料brapip2;1#3及brapip2;1#5。

　　分别在1/2ms培养基萌发前面转基因实验得到的brapip2;1#3及brapip2;1#5的纯系种子及野生型col-0材料（wt），再转入分别含10、50mg/l的噻虫嗪的1/2ms培养基(青岛海博生物技术有限公司，货号hb8469-1**h=5.6)中，20天后观察幼苗生长情况并测定主根长度,结果分别如图6a、b所示，转基因株系的主根长短低于野生型。

　　此外将萌发的大小一致的苗移栽至含10mg/l噻虫嗪的土壤中，培养20天后分别收获转基因拟南芥及对照的根部和地上部样品，用去离子水洗净，称量鲜重，参照文献（wenfengw,wanq,liy,etal.uptake,translocationandsubcellulardistributionofpesticidesinchinesecabbage(brassicarapavar.chinensis)[j].ecotoxicologyandenvironmentalsafety,2026.）测定和计算各样品的噻虫嗪含量，结果如图6c所示：转基因植株的根和地上部分的噻虫嗪含量高于野生株。

　　以上实施例说明，水通道蛋白brapip2;1基因资源具有灵敏地响应外界环境中新**类杀虫剂的特征，同时具有快速地介导新**类农药吸收和传输的功能，促进新**类农药在植株体内的积累，在改良（农）作物利用农药方面及农药开发方面具有重要的应用价值，为进一步通过改造农药结构开发内吸性农药来提高农药利用率奠定了基础。

　　序列表

　　<110>江苏省农业科学院

　　<120>吸收转运新**类杀虫剂的质膜内在水通道蛋白及其编码基因与应用

　　<160>8

　　<170>siposequencelisting1.0

　　<210>1

　　<211>864

　　<212>dna

　　<213>人工序列(artificialsequence)

　　<400>1

　　atggcgaaggacgtggaagccgtttccggagaagggtttcagacaagagactatcaagat60

　　ccaccgccagcgcctctgtttgacccggcggagctgaccaagtggtctttctacagagca120

　　gtcatcgctgagttcgtagctactctcctcttcctgtacatcaccgttttgacagtcatc180

　　ggttacaagattcagaccgatagtactgccggcggcgttgactgcggtggagttggtatc240

　　ctaggtatcgcttgggcttttggtggcatgatcttcatccttgtctactgcaccgccggt300

　　atctctggtggtcacattaacccggcagtgacatttgggctactcttagcgcgtaaagtg360

　　tccttggtaagagccattttgtacatggtagctcagtgtttgggtgcgatatgcggagtt420

　　gggttcgtcaaagccttccaaagctcttactacgtccgttacggtggtggagcaaactct480

　　ctagccgacggctacagcacaggaaccggactagccgcagagatcattggtactttcgtt540

　　cttgtctacaccgtcttctccgccactgaccctaaacgtagtgccagagactcccacgtc600

　　ccagtgttggcgccacttcccattggatttgcggtgttcatggtgcacttggctaccatt660

　　cccatcactggaactggaatcaacccggcaaggagtttcggagcagccgttatcttcaac720

　　gagagcaagccatgggatgaccactggatattttgggtgggaccattcgttggagctgcg780

　　atagctgcattctaccaccagttcgttttgagggcttcaggttccaagtctctcggatct840

　　ttcagaagtgctgccaacgtttaa864

　　<210>2

　　<211>287

　　<212>prt

　　<213>人工序列(artificialsequence)

　　<400>2

　　metalalysaspvalglualavalserglygluglypheglnthrarg

　　151015

　　asptyrglnaspproproproalaproleupheaspproalagluleu

　　202630

　　thrlystrpserphetyrargalavalilealagluphevalalathr

　　354045

　　leuleupheleutyrilethrvalleuthrvalileglytyrlysile

　　505560

　　glnthraspserthralaglyglyvalaspcysglyglyvalglyile

　　

　　leuglyilealatrpalapheglyglymetilepheileleuvaltyr

　　859095

　　cysthralaglyileserglyglyhisileasnproalavalthrphe

　　0

　　glyleuleuleualaarglysvalserleuvalargalaileleutyr

　　5

　　metvalalaglncysleuglyalailecysglyvalglyphevallys

　　0

　　alapheglnsersertyrtyrvalargtyrglyglyglyalaasnser

　　5160

　　leualaaspglytyrserthrglythrglyleualaalagluileile

　　5

　　glythrphevalleuvaltyrthrvalpheseralathraspprolys

　　0

　　argseralaargaspserhisvalprovalleualaproleuproile

　　5

　　glyphealavalphemetvalhisleualathrileproilethrgly

　　0

　　thrglyileasnproalaargserpheglyalaalavalilepheasn

　　5240

　　gluserlysprotrpaspasphistrpilephetrpvalglyprophe

　　5

　　valglyalaalailealaalaphetyrhisglnphevalleuargala

　　0

　　serglyserlysserleuglyserpheargseralaalaasnval

　　5

　　<210>3

　　<211>20

　　<212>dna

　　<213>人工序列(artificialsequence)

　　<400>3

　　atggcgaaggacgtggaagc20

　　<210>4

　　<211>22

　　<212>dna

　　<213>人工序列(artificialsequence)

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