农药毒性测试试验 农药毒理试验

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为什么做农药对蚯蚓的急性毒性实验

做农药对蚯蚓的急性毒性实验为进有关毒物对蚯蚓的生态毒性效应。根据动物行为获得的途径，动物行为可分为先天性行为和后天性学习行为.蚯蚓昼伏夜出是生来就有的，做农药对蚯蚓的急性毒性实验可以测试出实验的目的。

农药蚯蚓毒性测试是什么？

当前在评估塑料生物可降解性时，一般会按照欧盟的EN 或澳大利亚的AS 5810标准评估体系对塑料制品进行试验评估。该评估体系包括四个方面的试验：重金属和其他有毒有害物质试验、生物分解性能试验、崩解程度试验、生态毒性试验。

塑料制品即使通过了重金属和有毒有害物质测试、测定了生物分解性能和崩解性能，我们仍然无法确定塑料制品崩解后的残余土壤是否能无害的进入大自然、是否能够环境可持续地用于农林牧业的种植、养殖生产活动。 生态毒性试验则是一个对崩解后土壤进一步确认其对生态环境是否具有毒性的测试。

澳大利亚的AS 5810标准认为，必须要同时考虑崩解过程中由于微生物降解代谢产生的代谢产物的影响，因此AS 5810要求不仅要进行植物毒性试验，还要进行动物（蚯蚓）急性毒性试验。该试验方法用于评价在人工土壤中施用崩解后土壤之后对指定品种蚯蚓存活的影响。

相关测试标准

OECD 207ASTM E1676

测试原理

将指定品种、数量、体重的蚯蚓置于精确定义的人工土壤与不同浓度系列供试品的混合土壤中，在受控光照和温度条件下进行生息，最终在第7天和第14天评估蚯蚓的存活率、蚯蚓在行为和病理症状上的现象以及记录土壤中水分含量、pH等参数的变化情况。测试有效性在试验结束时，对照组中蚯蚓的死亡率不超过10%。

测试条件

温度：20±2℃光照：400~800 lux

测试设备

一般常用专门的蚯蚓急性毒性测试仪（RTK 207）进行测试。

农药蚯蚓毒性测试测试阶段是什么？

农药蚯蚓毒性测试测试阶段是：

将受试蚯蚓随机分组，每组不少于10条，设5个以上不同浓度组，另设一个对照组，每个浓度组设3～4个重复。农药浓度按等比级数分级，应当包括蚯蚓完全死亡和完全存活的浓度。试验容器用圆柱形带盖的玻璃缸（或搪瓷缸），高与直径比约为2∶1，容积为1、5～2、0升。每缸装500克人工合成土壤（干重），加入200毫升无离子水，混合均匀。供试农药先溶解于适量的水中，然后与土壤充分混合。难溶解于水的农药，如林丹等，可先溶解于丙酮或其他易挥发的有机溶剂中，然后加入到10克石英砂中混匀，待溶剂全部挥发后，将含有农药的石英砂再混入人工土壤中。将受试蚯蚓埋入土壤，盖好缸盖，防止水分蒸发和蚯蚓逃离，置容器于恒温恒湿箱中（温度为20±2℃、相对湿度为80～85%），饲养观察14天（必要时可延长到21天）。定期检查蚯蚓死亡数和中毒症状，并做好记录。试验结束后，根据蚯蚓死亡率用图解或计算方法求出LC50、LC100（蚯蚓全部死亡的最小浓度）、LC0（蚯蚓全部存活的最大浓度，即蚯蚓的最大耐受浓度）。

农药蚯蚓毒性测试准备条件有哪些？

主要包括土壤、蚯蚓的准备和预备试验。

1.试验用土壤性质以及pH值测定。为便于比较试验结果，试验使用的土壤要求标准化。根据欧洲共同体委员会和经济合作发展组织于1982年颁布的实验室测定农药对蚯蚓毒性的方法，规定使用人工合成土壤作为试验用的土壤。人工合成土壤的组分（按干重计）：石英砂（粒度0.05～0.2毫米）占83%，膨润土占5%，草炭（粉碎）占10%，碳酸钙占1%，腐熟碎马粪占1%。配制好的土壤，pH值约为7.0±0.2，有机质含量＞2%，试验期间土壤含水量维持在30～35%。

2.试验用蚯蚓。蚯蚓毒性试验受蚯蚓品种、龄期、健康状况的影响。因此试验规定使用的蚯蚓品种为赤子爱胜蚯蚓（Eiseniafoetida）。这种蚯蚓对农药的敏感性居中，分布广泛，繁殖快，容易饲养。试验前将受试蚯蚓在实验室按常规饲养观察15～20天。状态良好的蚯蚓应该是色鲜有光泽，环带清晰，体圆肥，对光、热敏感，在养殖槽中分布均匀；状态不良时聚集在一起，有的盘成球状，爬出床面来，色暗淡、无光泽。应选用状态良好的3月龄以上6月龄以下的成蚓（体重约350～400毫克）供试。

3.预备试验。进行毒性试验之前，应该先作几次预备试验，以便按农药的有效成分确定出浓度范围，包括蚯蚓全部死亡和全部存活的农药浓度，为正式进行毒性试验的剂量选择和蚯蚓分组提供必要资料。

农药的健康安全评价是怎样的？

我国于1991年发布了《农药安全性毒理学评价程序》。作为中华人民共和国国家标准的《农药登记毒理学试验方法》于1995年颁布（标准号为GB-1995）。

《农药安全性毒理学评价程序》将农药毒理学评价分成四个阶段：

第一阶段：动物急性毒性试验和皮肤及眼睛黏膜试验；

第二阶段：蓄积毒性和突变试验；

第三阶段：亚慢性毒性试验（包括迟发神经毒性试验、两代繁殖试验和致畸试验）和代谢试验；

第四阶段：慢性毒性（包括致癌）试验。

《程序》凡属正式登记的农药，一般均需提供上述四个阶段的全套资料。

《农药登记毒理学试验方法》基本上采用等级划分法对农药毒性测试结果进行评价。例如，农药的急性毒性划分为4个等级，农药的皮肤刺激强度划分为四个等级，农药的皮肤致敏强度划分为5个等级，农药蓄积毒性划分为4个等级。

农药急性毒性等级划分

农药对皮肤刺激性和致敏性强度等级划分

农药蓄积毒性等级划分