蔬菜中农药残留测定实验 蔬菜中农药残留测定实验方法
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怎样检测蔬菜中的农药残留量
以分光光度计测试(412nm波长)时,按下式计算抑制率:抑制率(%)=[(ΔΑ0-ΔΑt )/ΔΑ0]×100。
在一定条件下,有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率与农药的浓度呈正相关系。
正常情况下,酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解,其水解产物显色剂反应,产生黄色物质,用农药残留检测仪器测定吸光度随时间的变化值,计算出抑制率,通过抑制率可以判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
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扩展资料
食品中的农药残留分析为在复杂的基质中对目标化合物进行鉴别和定量。农药残留的一般分析过程为提取-净化-检测。经典的农药残留分析步骤通常是:水溶性溶剂提取-非水溶性溶剂再分配-固相吸附柱净化-气相或液相色谱检测。
其中提取和净化为前处理部分,样品前处理不仅要求尽可能完全提取其中的待测组分,还要尽可能除去与目标物同时存在的杂质,避免对色谱柱和检测器等的污染,减少对检测结果的干扰,提高检测的灵敏度和准确性。因此提取、净化是农药残留分析过程中一个十分重要的前处理步骤,其好坏直接影响到分析结果的正确性和可靠性。

经典的提取、净化方法主要有:振荡浸取、组织捣碎、超声波提取、索氏提取、液-液分配、柱层析、共沸蒸馏等技术。随着科技的进步,样品前处理技术向着省时、省力、廉价、节省溶剂、减少对环境的污染、微型化和自动化方向发展。
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蔬菜中的农药残留怎么检测
三方圆农药速测卡是用对农药高度敏感的胆碱酯酶和显色剂做成的酶试纸,可以快速检测蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯这两类用量较大、毒性较高的杀虫剂的残留情况。本法抗干扰性强,操作简便,不需要仪器设备和配制试剂就能单独使用,无需任何专业技术培训。产品容易贮存,携带方便,是现场检测的最佳方法。
结果判定及示意图:
与空白对照卡比较,白色药片不变色或略有浅蓝色均为阳性结果,不变蓝为强阳性结果,说明农药残留量较高,显浅蓝色为弱阳性结果,说明农药残留量相对较低。白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同,为阴性结果。对阳性结果的样品,可用其它分析方法进一步确定具体农药品种和含量。
检测限(单位mg/kg)如下:
甲胺磷1.7马拉硫磷2.0水胺硫磷3.1

对硫磷1.7氧化乐果2.3久效磷2.5
乙酰甲胺磷3.5敌敌畏0.3乐果1.3
敌百虫0.3呋喃丹0.5西维因2.5好年冬1.0
实验室怎样做蔬菜农药残留的实验
实验设计:将蔬菜喷洒农药后,分成6份,分别用清水、0.4%苏打水、淘米水、1%盐水、蔬果清洗剂、贝壳除菌粉浸泡10分钟,然后检测得出数据。
本次实验没有选“用水冲洗”这种方式,因为在实验室农药喷洒后只需经过1小时沥干,农药基本停留在蔬菜表面,但在现实生活中,农药停留一般会超过24小时以上,因此就这样用水冲洗的实验效果不具有参考价值。
实验过程:实验选用了毒死蜱(油溶性的)、三唑磷(有一定水溶性)、阿维菌素(生物农药)这三种农药。
如何测定蔬菜中残留农药?
一般常用两种方法:

酶抑制法和色谱法
酶抑制法:
原理:有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酶的活性,造成神经传导介质乙酰胆碱的积累,影响正常传导,使昆虫中毒致死,根据这一昆虫毒理学原理,用在对农药残留的检测中。加入反应试剂后,用分光光度计测定吸光值随时间的变化值,计算出抑制率,判断蔬菜中含有机磷或氨基甲酸酯类农药的残毒情况。 乙酰胆碱酯酶+有机磷或氨基甲酸酯类农药——→酶活性被抑制
乙酰胆碱酯酶+样本提取液——→
1. 活性被抑制——→样本中含有有机磷或氨基甲酸酯类农药
2.活性正常 ——→样本中不含有有机磷或氨基甲酸酯类农药
如以乙酰硫代胆碱(AsCh)为底物,在乙酰胆碱酯酶(AchE)的作用下乙酰硫代胆碱(AsCh)水解成硫代胆碱和乙酸,硫代胆碱和二硫双对硝基本甲酸(DTNB)产生显色反应,使反应液呈黄色,在分光光度计410nm处有最大吸收峰,用分光光度计可测得酶活性被抑制程度(用抑制率表示)。

速测卡用的也是这个原理,但是这个方法只能只能知道或许含有有机磷和氨基甲酸酯类农药。而且不能定性定量的检测,只是一个表征。
色谱法:
前处理过程,取3KG的样品,用食品加工机打碎,然后称取25克,加入乙腈提取液均浆,过滤,加入食盐,震荡,静置分层,然后去上层有机相10毫升,到氮吹仪上吹至近干,用丙酮转移,定容到5毫升,混匀,过膜,装入1.5毫升的样品瓶中,上气相色谱仪(FPD),外标法,能检测有机磷,讲吹近干的提取液,用正己烷烷、正己烷和丙酮的混合液转移,过弗洛里矽柱到15毫升,再氮吹至5毫升以下,用正己烷定容到5毫升,转移到样品瓶,上气象色谱仪(ECD)能检测有机氯农药。
其他种类的农药,吡啶类、除草剂等就要上液相色谱仪,或者是质谱仪!
水果蔬菜中的有机农药残留量的测定方法
4.
实验步骤:
4.1

样品的处理
取A、B、C三种蔬菜样品,各1g左右,放入三个洁净的烧杯中。
加入5mL提取液,震荡混匀10min
取待测液2.5mL,加入酶液0.1mL,显色剂0.1mL,混匀静止10min
在比色管中加入2.5mL样品提取液,待用
4.2
对照溶液测试

取提取液2.5mL,加入酶液0.1mL,显色剂0.1mL,混匀静止10min
立即加入0.1mL底物摇匀,此时检液开始显色反应,立即放入仪器比色皿中,按照仪器操作规范,点击对照按钮,在3号通道进行测定,3min后记录抑制率。
4.3
样品溶液测试
立即加入0.1mL底物摇匀,此时检液开始显色反应,立即放入仪器比色皿中,按照仪器操作规范,点击对照按钮,在3号通道进行测定,3min后记录抑制率。
四.注意事项
1.

所有使用液使用前都要摇匀,用一瓶取一瓶,防止其他物质污染,以免溶液中毒失效。
2.
反应瓶及反应容器应该用去污粉洗涤后再用自来水及蒸馏水洗涤,不能用酸性溶液洗涤,最好也不使用洗洁精。
3.
取样时需要注意典型性和代表性,去除不可食用部位。
4.
取用反应液及酶液的器具需要专用并做好标记,所有溶液做到只进不出。

五.实验结果
我们组的实验结果失败,用的第2小组的数据:
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率大于50%时,表示样品中有高剂量有机磷或氨基甲酸甲酯类农药存在可判定样品为阳性结果。
实验测定的结果为:
样品
质量m/g
抑制率%

阳性(抑制率50%)
A
1.094
6.39
阴性
B
1.114

63.17
阳性
C
1.037
15.47
阴性
从测定的结果来看,B号样品的有机磷农药表现为阳性,A、C号样品的有机磷农药表现为阴性,初步可以判定B号样品中农药残留不合格。但要确定其使用农药种类和数量必须通过其他手段进一步定性和定量。

从抑制率来看,BCA,从而可以初步判断,样品中有机磷的含量依次为BCA。有机磷农药在蔬菜上的残留与吸收能力依次为:根菜类叶菜类果菜类,本次实验选用的蔬菜是卷心菜与生菜,都是属于叶菜类的蔬菜,比较容易积累和吸收有机磷农药




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