生产菌种保藏方法

生产菌种保藏是指将某种菌株保存在适宜的条件下，以便长期保存和使用。保藏菌种的目的是为了保持其稳定性和活力，以便在需要时进行使用。

常见的生产菌种保藏方法

1.冷冻保藏法：将菌株培养物培养至对数生长期，制备冷冻液，然后将菌株混合冷冻液保存在低温下，通常为-80°C。这种方法适用于大多数菌株，保存时间可达数年。

2.干燥保藏法：将菌株培养物培养至对数生长期，然后用无菌吸水纸吸干，将干燥的菌株保存在无菌容器中。这种方法适用于耐干燥的菌株，保存时间可达数年。

3.高温保藏法：将菌株培养物培养至对数生长期，然后将菌株保存在高温下，通常为50-60°C。这种方法适用于耐高温的菌株，保存时间可达数月。

4.液氮保藏法：将菌株培养物培养至对数生长期，然后将菌株保存在液氮中，通常为-196°C。这种方法适用于对温度要求极低的菌株，保存时间可达数十年。

保藏菌种的注意事项

1.菌种的选择：选择具有良好活力和稳定性的菌株进行保藏。

2.培养基的选择：根据菌株的特性选择适宜的培养基进行培养。

3.保存条件的控制：根据不同的保藏方法，控制好温度、湿度等条件。

4.保藏记录的完善：对每个保藏的菌株都要进行详细的记录，包括菌株的来源、保藏时间等信息。

5.定期检测：定期检测保藏菌株的活力和稳定性，如果发现异常，及时采取措施进行修复或重新保藏。

保藏菌种是生产过程中非常重要的一环，合理选择和控制保藏方法可以确保菌株的长期保存和使用。同时，保藏菌种也是保护菌种资源的重要手段，对于保护和研究菌种具有重要意义。

相关问答拓展:

微生物菌种保藏方法？1、传代保藏传代保藏菌种是微生物保存中最常用的方法之一。很多微生物在低温或者干燥处理时，会很快死亡，为了保存菌种的活性，就要定期不断的进行菌种转接、培养后再保存。

2、斜面低温保藏将待保藏的菌种接种在合适的斜面培养基上，在相应的条件下培养至得到充足的菌体或者孢子，随后密封试管置于4℃左右保存，具体保存温度按照保存菌种设定。保藏时间依微生物的种类从1个月到4个月不等。

3、冷冻干燥保藏冷冻干燥保藏法为菌种保藏方法中最有效的方法之一，对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用，这种方法适用于菌种长期保存，一般可保存数年至十余年。我国大多数生物制品菌种都是采用该法保藏。

4、半固体穿刺保藏配制半固体培养基，高压湿热灭菌后倒于无菌试管中至约1/3，待培养基凝固，用接种环从平面培养基上挑取单菌落，穿入培养基若干次。在合适的条件下进行培养至菌体旺盛生长，之后密封试管，根据菌种特点在4℃左右或者凉爽干燥处保存。保存时间至少可以达到1年，对于有些菌种甚至能达到20年之久。

5、液氮超低温保藏液氮超低温保藏法是菌种长期保藏的最有效最可靠的方法。液超低温保藏法是把菌种装在含有冷冻保护剂的安瓶瓶内，将该安瓶瓶放人液氮（-196℃）中保藏。

6、冷冻真空干燥保藏将处于成熟期的微生物培养物悬浮于无菌的血清、卵白、脱脂奶或者海藻糖等保护剂中制成浓菌液，分装到无菌的安瓿瓶中，于低温冰箱中冷冻，达到预定温度后对浓菌液进行冷冻干燥处理，之后在真空状态下融封安瓿瓶，于20℃保藏。

7、蒸馏水保藏蒸馏水保藏菌种的方法普遍的应用于医学微生物、食品微生物和工业微生物中。将菌体悬浮于蒸馏水中，即可在室温下保存数年，此法应注意避免水分的蒸发。

长期保存菌种的方法？液体石蜡保存法

液体石蜡保存法就是在斜面菌种或穿刺菌种表面覆盖一层液体石蜡，从而隔绝空气，减少菌种及培养物水分挥发，保藏温度要求在4℃下即可。

将培养好的菌种斜面，缓慢倒入无菌的液体石蜡，使石蜡高出斜面顶端1厘米，直立放置，低温保存就可以，霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死，酵母菌可保藏1-2年。

沙土保存法

沙土保藏法是将菌种吸附在适当的载体上，而后进行干燥的保藏。将培养好的菌种接入沙土管内，用真空泵抽气至干。细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏，前两者可保藏2年左右，有些丝状真菌甚至可保藏14-17年之久。

甘油管保存法

甘油管保存是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。配置30%浓度的无菌甘油，将培养好的菌种与甘油充分混合均匀，放入-20℃保存。

冷冻干燥保藏法

冷冻干燥保存法就是将菌种与保护剂混合均匀后，快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分，兼具低温、干燥、除氧三方。干燥后的菌种在真空环境下可长期保存。常用的菌种保藏方法有哪些？

菌种保存的方法有斜面低温保藏法、液体石蜡覆盖保藏法、沙土保藏法、滤纸保藏法、甘油管保存法、冷冻干燥保存法。1、斜面低温保藏法：将菌种接种到适合的固体斜面培养基上，用油纸将棉塞部分包扎好，然后转移至2-8℃的冰箱中进行保存。2、液体石蜡覆盖保藏法：使用液体石蜡将斜面菌覆盖住，使其和空气隔绝。

一、菌种保存的方法有哪些

1、斜面低温保藏法

（1）将菌种接种到适合的固体斜面培养基上，等到菌种充分生长过后，使用油纸将棉塞部分包扎好，然后转移至2-8℃的冰箱中进行保存。

（2）如果是霉菌、放线菌及有芽孢的细菌，一般可以保存2-4个月左右，需要移种一次。如果是酵母菌，一般可以保存2个月左右，需要每个月移种一次。

2、液体石蜡覆盖保藏法

（1）将液体石蜡装在三角烧瓶中，并使用棉塞塞好，用牛皮纸进行包扎，然后在0.1MPa，121.3℃的环境下灭菌30分钟左右，接着将其放置在40℃的温箱之中，将水汽蒸发掉。

（2）将需要保藏的菌种，用适合的斜面培养基进行培养，得到健壮的孢子或者是菌体。

（3）使用灭菌过的吸管将液体石蜡吸出，注入斜面上，用量为高出斜面顶端1cm左右为宜。

（4）将试管直立，放置在低温或者是室温之下进行保存。

（5）霉菌、放线菌、芽孢细菌可以保藏2年以上不死，酵母菌可以保藏1-2年，一般无芽孢细菌可以保藏1年，脑膜炎球菌可以保藏3个月左右（37℃环境下）。

3、沙土保藏法

（1）准备好河沙，加入10%稀盐酸，然后加热煮沸30分钟左右，将里面的有机质去掉，然后将酸水倒掉，用自来冲洗至ph为中性，接着烘干，过筛（40目筛子），去掉粗颗粒。

（2）准备好非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土，浸泡洗涤数次，直至ph为中性，然后烘干，碾碎，过筛（100目筛子），去掉粗颗粒。

（3）将沙和土按照2：1的比例混合，装入试管或者是安瓿管中，塞好棉塞，在1212℃的环境下灭菌30分钟左右。

（4）将菌种在斜面培养基中培养，得到健壮的菌体，然后向斜面培养物中注入3-5ml无菌水，洗下细胞或孢子制成菌悬液。

（5）使用灭菌过的吸管吸取菌悬液，然后均匀滴入沙土管中（0.2-0.5ml/管）。如果是放线菌或霉菌，可以直接挑取孢子拌入沙土管中。

（6）真空抽去沙土管中的水分。

（7）将沙土管用火焰熔封，然后存放在低温(4-6℃)干燥处保藏，或者是将沙土管用牛皮纸或塑料纸包好，放置在干燥器内保存。