叶下珠柱层析中装柱高度

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　　锡兰叶下珠Phyllanthu**yrtifolus枝条紫红色，春季开花，小花红色生于枝腋，因梗长而。

　　**似小珠而得名。盾柱木Peltophorumpterocarpum落叶乔木，树高可达十公尺以上。

　　适合用于三明市培育种植和生长的园林绿化苗木品种有哪些。

　　扦插时间：可在3月初至4月中旬选1年生春梢进行扦插，这是最佳扦插时间。也可在6月下旬至8月下旬选当年生的半熟枝进行带踵扦插，但它对温湿度的控制要求高。

　　扦插时间的选择与温度的掌握。桂花扦插以五六月份最佳。

　　桂花的适生根温度为25℃至28℃，如温度过低，应覆盖塑料薄膜，增加光照，提高苗床温度。如温度过高，应注意遮阴，并揭起塑料膜一角通风降温或喷雾降温。

　　扦插基质及苗床。扦插基质要求疏松透气、排水良好、含腐殖质高的酸性土或沙质土，最好用蛭石。

　　苗床四周应留通道，开好排水沟。插前土壤要消毒。

　　苗床上设一个高度45厘米的塑料拱棚，以保湿并防淋雨积水。棚上再搭一个高约16米的遮阴棚。

　　插穗的选择及处理。插穗的采取应在早晚或阴天进行。

　　插穗选用半木质化枝条，剪成10厘米至12厘米长，下端紧靠节下削成马蹄形，上端留2个至3个叶片。

　　插穗下端蘸ABT生根粉或用200ppm至500ppm吲哚丁酸浸泡5分钟至10分钟，入土2/3，株行距6×6厘米。

　　插后浇透水，然后盖上塑料薄膜。

　　土壤湿度要求在50%左右为宜，而空气湿度则要求保持在85%以上为最好。

　　扦插初期阴棚遮阴度保持在80%左右，这样既防止强光直晒，又保证有足够的散射光照，以利带叶插穗进行光合作用，有利于生根。

　　10天后，叶喷02%的磷酸二氢钾或05%的过磷酸钙和01%的**素溶液一次。

　　30天后基本生根，可揭去薄膜，并增加光照。生根后的小苗，夏季晴天要注意叶面喷雾与遮阴。

　　为使小苗生长健壮，可叶面喷施005%的“叶面宝”，不要从根系施肥。

好文探索：干货+福利｜揭秘层析柱装填的流程与技巧

　　好的柱效是层析的关键因素之一，较高的柱效可以分离出纯度较高的目标物质，尤其是在抗体纯化过程中对电荷异构体和多聚体的去除。Cytiva提供了从实验室规模到中式规模再到大生产规模通常所需大小的柱子，一般常用到的如下表1、

　　后文也将详细介绍层析柱的装柱过程以及常见问题解答。

　　表1Cytiva不同规模下的层析柱。

　　（1）填料需求量的计算：slurry体积Vslurry=S×H×PF/Cslurry。

　　装柱因子（PackingFactor，PF）：指在在装柱过程中，用低流速（如60cm/h）对填料进行沉降压缩得到的填料高度和最后装柱完成时填料高度（柱高）的比值。

　　注解：Vslurry：装柱所需胶悬液体积。S：层析柱截面积。H：装柱高度。PF：装柱因子。Cslurry：胶悬液浓度。

　　Cytiva大多数填料都保存在20%乙醇中，装柱前需将填料置换为说明书中推荐的装柱缓冲液，不仅包括常见的水，还包括20%乙醇，0.4MNaCl等溶液。

　　一步装填：设置一个固定的流速或压力，一步完成填料的沉降和压缩。

　　两步装填：首先以低流速完成填料的沉降，然后在第二步中以更高的流速或恒定的压力进行填料的压缩。

　　恒压装填：以恒定压力将胶悬液通过装柱工作站喷进层析柱内，当填料距离装柱目标高度一定距离时停止喷胶，填料会自动反弹到目标装柱高度。

　　轴向压缩装填：先以恒定流速让填料在层析柱内形成稳定柱床，然后按照装柱因子将柱头下降至目标装柱高度。

　　胶悬液浓度控制在50%-60%。

　　D。了解填料装柱因子和关键装柱参数。

　　不同的填料对装柱的压力和装柱条件都有一定的要求，现汇总如下表2和表3、

　　表3不同填料装柱方法汇总（其他填料可参考）。

　　柱效测定主要分为丙酮法和氯化钠法，两种测试方法的结果比较类似，可根据实际需求择一测定即可。

　　一般，柱效会直接影响到试验结果。

　　好的柱效能够保证液体均一流过层析柱，保证样品经过柱子产生尖锐而狭窄的峰，提供良好的分辨率。

　　AKTA中Unicorn软件具备功能完善的数据管理、权限分级、审计追踪和电子签名功能，利用该软件实现层析柱装填效果的判定。

　　表6填料装填对称性不好的解决措施。

　　②不同的装柱缓冲液会影响填料的哪些参数。

　　在不同的装柱缓冲液中，填料的压缩因子也会不同。通常填料在水和20％乙醇中均可快速沉降。

　　添加一定的盐会减慢填料沉降的速度，但同时也可以帮助填料不会压得过于紧实。

　　从实验室规模到大生产规模，层析柱的装填原理一样，但在线性放大的过程中，工业层析柱的选择需要考虑柱壁效应、分布效果、卫生性设计、化学耐受性等众多因素。

　　如果采用自动化程度高的新一代全自动智能轴向压缩层析柱，装柱工作站内置Cytiva各种填料的装柱因子和装柱参数，通过直观的向导模式指导装柱过程，可以避免对人员的依赖性，同时可以减少装柱不平整，污染等问题。 随生物制药行业的飞速发展，企业对自动化程度的需求越来越高，较传统的开放式的装填方式也发展到更加方便的在位装填（工作站在线吸胶）。

　　而Cytiva的Axichrom系列层析柱，可以很好的满足以上的需求，它采用轴向压缩的方式，独有的专利技术USB2专门的清洁设计支持清洁验证，为层析工艺的放大保驾护航。

　　为了给大家带来更多装柱干货知识，生物制品圈特邀请Cytiva工艺开发市场经理马志宇老师带来直播讲座：解锁从实验室到产业化，层析柱装填的技巧与方法。

　　解锁从实验室到产业化，层析柱装填的技巧与方法。

　　2023年5月13日20：00。

　　新一代实验室和产业化层析柱的选择。

　　马志宇，Cytiva市场经理，曾担任生物工艺开发应用专家，资深下游层析介质产品专家，以及实验室工艺开发平台，生物制药行业的解决方案经理，在生物制品行业有13年的经验积累。

　　直播期间会有多位层析装填技术专家同步在线答疑，全方位立体化直播，机会不容错过，快来报名吧。

　　GEHealthcare。AxiChromcolumns，Datafile28-9290-41AJ。

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