硫酸铵沉淀蛋白质的注意事项

1、造成蛋白质变质的程度：固体的硫酸铵硫酸铵饱和溶液利用硫酸铵饱和溶液真的超棒，滴入的速度可以很快而不造成变质(没试过用倒入的)。

2、溶液中的离子强度不同时，不同蛋白质的溶解度不同。高浓度的盐离子在蛋白质溶液中可与蛋白质竞争水分子，从而破坏蛋白质表面的水化膜，降低其溶解度，使之从溶液中沉淀出来。

3、硫酸铵沉淀后的蛋白通过透析除盐。除了透析除盐外，还有什么方式可以除去硫酸铵采用有机溶剂沉淀溶液中的硫酸铵这种方法，比较少见，主要是有机溶剂容易是蛋白质变性。想去除溶液中的硫酸铵，方法较多。

4、蛋白质的盐析反应，加饱和硫酸铵，生成沉淀，静置，然后倒出少量混浊沉淀，加水，沉淀溶解。原因：硫酸铵使蛋白质发生盐析，是可逆沉淀，加水后可以溶解。

5、硫酸铵沉淀的蛋白用硫酸铵溶解。根据查询相关资料信息显示，硫酸铵沉淀的蛋白在80%饱和硫酸铵浓度下，会溶解，硫酸铵最大溶解量约为76。

6、基本原理：硫酸铵沉淀法可用于从大量粗制剂中浓缩和部分纯化蛋白质。用此方法可以将主要的免疫球从样品中分离，是免疫球蛋白分离的常用方法。

硫酸铵试剂：用于与溶液中的目标物质反应生成沉淀。目标物质溶液：含有需要分离的目标物质的溶液。烧杯或容量瓶：用于容纳目标物质溶液。搅拌棒：用于搅拌溶液。过滤纸：用于过滤沉淀。漏斗：用于过滤溶液。

保留上清液；上清液再加SAS到0.5：1(v/v)，再次离心得到沉淀。

各种蛋白质的溶解度不同，因而可利用不同浓度的盐溶液来沉淀不同的蛋白质。这种方法称之为盐析。

用高速离心机进行离心，淀粉酶沉淀在容器底部，倒掉上层的清液，生在容器底部的酶就是比较纯的淀粉酶了。不过用硫酸铵分级后得到的淀粉酶，内部含有硫酸铵，用定氮法无法准确测量酶的含量。可以用钼酸铵法来进行测量。

总硫酸铵沉淀法纯化蛋白质采用的是盐析法。当硫酸铵溶液达到饱和时，蛋白质大量析出。采用硫酸铵，因为不含有水，可以很快达到饱和度，从而使蛋白质析出。

沉淀形成：随着硫酸铵试剂的加入，溶液中的目标物质与硫酸铵反应生成沉淀。沉淀的形成速度和形态取决于目标物质的性质和实验条件。过滤沉淀：当沉淀形成后，使用漏斗和过滤纸将溶液中的沉淀分离出来。

根据查询相关**息显示，当硫酸铵的浓度较高时，它可以与其他化合物形成复合物，从而干扰分级沉淀的过程，并且在过程中形成的固体颗粒较小且难以沉淀或过滤。

硫酸铵分级：不同的蛋白质可用不同浓度的硫酸铵沉淀，由此将不同的蛋白质分开的方法。用于蛋白质分离纯化的盐析技术。硫酸铵：无色结晶或白色颗粒。无气味。280℃以上分解。水中溶解度：0℃时70.6g，100℃时108g。

沉淀反应至少应在50mm/L缓冲液中进行。在硫酸铵分级沉淀蛋白质的注意事项有沉淀反应至少应在50mm/L缓冲液中进行，是为了平衡硫酸铵溶解时产生的轻微酸化作用。

饱和硫酸铵则可沉淀包括**清蛋白在内的全部蛋白质。分段盐析的条件先需要进行小实验探索，如：先进行0%-30的硫酸铵沉淀，再进行30%-60%的硫酸铵沉淀，最后进行60%-80%的硫酸铵沉淀。

用高速离心机进行离心，淀粉酶沉淀在容器底部，倒掉上层的清液，生在容器底部的酶就是比较纯的淀粉酶了。不过用硫酸铵分级后得到的淀粉酶，内部含有硫酸铵，用定氮法无法准确测量酶的含量。可以用钼酸铵法来进行测量。